氨氮是水體中氮元素的一種存在形式，主要來源于生活污水、工業廢水及農業徑流。其含量高低直接反映水體受污染程度，也是水質評價的關鍵指標之一。分光光度法因操作簡便、靈敏度高、設備普及，成為實驗室測定氨氮的常用手段。本文以納氏試劑分光光度法為例，闡述檢測流程及注意事項。

一、方法原理

水樣中的氨氮與納氏試劑（碘化汞鉀的堿性溶液）在堿性條件下發生反應，生成黃棕色絡合物。該絡合物的色度與氨氮濃度呈正比，在波長420 nm處測定吸光度，通過標準曲線定量。反應式可簡寫為：氨與碘化汞鉀生成氨基碘化汞棕黃色沉淀或膠體復合物。

二、試劑與儀器準備

核心試劑包括：無氨水（用于稀釋和清洗，避免背景干擾）、納氏試劑（市售成品或按標準配制）、酒石酸鉀鈉溶液（掩蔽鈣鎂等金屬離子，消除沉淀干擾）、氨氮標準貯備液（通常為氯化銨配制）。儀器主要包括可見分光光度計（配1 cm或2 cm比色皿）、比色管（50 mL）、移液管或移液器及預處理用濾紙或離心機。

三、樣品采集與保存

水樣應采集于潔凈玻璃或聚乙烯瓶中，充滿瓶塞以減少空氣接觸。采樣后立即測定最佳；若不能及時分析，需加硫酸至pH＜2，于4℃冷藏，并在24小時內完成檢測。測定前恢復室溫并用氫氧化鈉或鹽酸調回中性。

四、測定步驟

第一，樣品預處理。對于澄清透明、不含懸浮物的水樣可直接測定。若水樣渾濁或帶色，需經絮凝沉淀或蒸餾預處理。絮凝法：加入硫酸鋅和氫氧化鈉，沉淀后取上清液。蒸餾法適用于干擾嚴重的水樣。

第二，標準曲線繪制。取6支50 mL比色管，分別加入0、0.5、1.0、2.0、3.0、5.0 mL氨氮標準使用液（濃度自定，如10 mg/L），加無氨水至標線。依次加入1.0 mL酒石酸鉀鈉溶液，混勻；再加1.5 mL納氏試劑，再次混勻。靜置10分鐘顯色。

第三，樣品測定。取適量預處理后的水樣（含氨氮不超過0.1 mg）于比色管中，加無氨水至50 mL標線。按與標準曲線相同的順序加入酒石酸鉀鈉和納氏試劑，同條件下顯色。

第四，吸光度測量。以無氨水為參比，于420 nm波長處測定各標準管及樣品管的吸光度。繪制標準曲線（吸光度－氨氮質量），從曲線上查得樣品管對應的氨氮質量，再除以取樣體積即得濃度。

五、關鍵注意事項

納氏試劑含汞鹽，屬劇毒物質，操作須佩戴手套護目鏡，廢液集中回收。顯色時間和溫度應盡量一致，避免因反應程度不同引入誤差。酒石酸鉀鈉溶液需檢驗是否含氨，否則會導致空白升高。比色皿光面須保持清潔，測定后立即清洗。若樣品吸光度超出標準曲線范圍，應稀釋后重新測定。

納氏試劑分光光度法的檢出限通常為0.025 mg/L，測定下限約0.1 mg/L，適用于地表水、地下水及生活污水中的氨氮分析。對于工業廢水中較高濃度氨氮，可適當減少取樣量或稀釋后再測。該方法重現性好，但須嚴格排除干擾，特別是色度、濁度和金屬離子的影響。